Anticorpo MBP-probe (R3.2): sc-53366

I vettori plasmidici per l'espressione di regioni codificanti di geni eucariotici in ospiti batterici, insetti e mammiferi sono di uso comune; tali vettori di espressione spesso codificano proteine di fusione ibride costituite in parte da proteine procariotiche e in parte da proteine eucariotiche specificate. Uno di questi sistemi utilizza la proteina legante il maltosio (MBP), il prodotto di 370 aminoacidi del gene mal E di E. coli. Sono stati costruiti vettori plasmidici che utilizzano il dominio della MBP e che consentono la sintesi di alti livelli di proteine di fusione MBP che possono essere purificate in un'unica fase mediante cromatografia di affinità con resina di amilosio. Una volta legata all'amilosio, la proteina MBP può essere separata dalla proteina bersaglio mediante clivaggio da parte del fattore di coagulazione Xa in un sito specifico di quattro residui. In alternativa, la proteina di fusione intatta può essere eluita in modo specifico dalla resina con l'aggiunta di maltosio libero in eccesso. Dopo l'eluizione, la proteina di fusione MBP può essere visualizzata mediante analisi Western blot o immunoprecipitazione utilizzando anticorpi specifici per l'etichetta MBP. I sistemi di espressione che utilizzano il tag di fusione MBP includono i vettori pCG-806fx e pMal.

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Anticorpo MBP-probe (R3.2) Riferimenti:

1. Stimolazione dell'ATPasi del trasportatore di maltosio da parte della proteina legante il maltosio non legata.  |  Gould, AD., et al. 2009. Biochemistry. 48: 8051-61. PMID: 19630440
2. Struttura di una proteina di fusione della proteina legante il maltosio della β-lattamasi ingegnerizzata: intuizioni sulla regolazione allosterica eterotropa.  |  Ke, W., et al. 2012. PLoS One. 7: e39168. PMID: 22720063
3. Interazioni competitive di ligandi e crowder macromolecolari con la proteina legante il maltosio.  |  Miklos, AC., et al. 2013. PLoS One. 8: e74969. PMID: 24124463
4. Espressione solubile ad alta resa, purificazione e caratterizzazione della proteina regolatrice steroidogenica acuta umana (StAR) fusa con una Maltose-Binding Protein (MBP) clivabile.  |  Sluchanko, NN., et al. 2016. Protein Expr Purif. 119: 27-35. PMID: 26555181
5. Persistenza dinamica dei siti attivi identificati nella proteina legante il maltosio.  |  Nikolić, D. and Kovačev-Nikolić, V. 2017. J Mol Model. 23: 167. PMID: 28451879
6. Chemorecettore del maltosio di Escherichia coli: interazione tra la proteina legante il maltosio e il trasduttore del segnale tar.  |  Kossmann, M., et al. 1988. J Bacteriol. 170: 4516-21. PMID: 3049536
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9. La proteina legante il maltosio come scaffold per la visualizzazione monovalente di peptidi derivati da librerie di fagi.  |  Zwick, MB., et al. 1998. Anal Biochem. 264: 87-97. PMID: 9784192
10. Il modello del complesso proteina legante il maltosio/chemorecettore supporta il meccanismo di segnalazione intrasubunitario.  |  Zhang, Y., et al. 1999. Proc Natl Acad Sci U S A. 96: 939-44. PMID: 9927672

L'anticorpo MBP-probe preferito è l'anticorpo MBP-probe (R29.6): sc-13564.