Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ZO-1 Antibody (R40.76) Alexa Fluor® 680: sc-33725 AF680. Direct near-infrared western blot analysis of ZO-1 expression in Caco-2 whole cell lysate. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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ZO-1双切口酶质粒(h): sc-400196-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ZO-1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ZO-1双切酶质粒（h）和ZO-1双切酶质粒（h2）编码针对TJP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ZO-1: sc-33725，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ZO-1双切口酶质粒(h) | sc-400196-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ZO-1双切口酶质粒(h2) | sc-400196-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TJP1 编码紧密连接支架蛋白 ZO-1。ZO-1 是一种多结构域适配蛋白，可将 claudin 和 occludin 与细胞皮层肌动蛋白骨架连接起来，从而组织上皮与内皮屏障的结构。ZO-1 通过与信号通路及细胞极性复合体相互作用，协调连接的组装、力学信号转导以及细胞骨架重塑，整合细胞-细胞黏附、通透性控制和接触依赖性的生长调控等过程。TJP1 的表达或定位发生扰动与紧密连接紊乱及旁细胞通量改变相关，这些现象常见于炎症、纤维化以及肿瘤细胞播散过程中。作为连接稳定性的核心调控因子，ZO-1 被广泛用于研究屏障完整性与上皮-间质动态变化相关的通路。
ZO-1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TJP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TJP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TJP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TJP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。