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Zic4双切口酶质粒(h) | sc-407517-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Zic4双切口酶质粒(h2) | sc-407517-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ZIC4 编码锌指转录因子 Zic4,这是一种核内调控因子,可与 DNA 结合,在胚胎模式形成与神经发育过程中调控基因表达程序。Zic4 参与协调神经元分化、发育中脑区的区域身份以及小脑形态发生的转录网络,并与 WNT、SHH 等发育信号通路发生交互,这些通路共同塑造背侧中线与后脑结构。ZIC4 剂量异常或其调控功能受损与先天性脑畸形及神经发育相关表型有关,因此该基因位点对于研究神经谱系中的转录调控具有重要价值。在细胞模型中,对 ZIC4 的扰动有助于界定调控祖细胞命运决定、神经元成熟以及谱系特异性染色质状态的基因调控网络。
Zic4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ZIC4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ZIC4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ZIC4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ZIC4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。