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ZBP1双切口酶质粒(m) | sc-425482-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
ZBP1双切口酶质粒(m2) | sc-425482-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Zbp1 基因编码 ZBP1(也称为 DAI),这是一种位于胞质的核酸传感器,能够结合 Z 型核酸并作为先天免疫接头蛋白发挥作用。ZBP1 在感知病毒或内源性核酸后,会招募 RIPK3 及其他信号节点,促进干扰素刺激基因(ISG)程序和炎症反应,并可与包括程序性坏死(necroptosis)在内的受调控细胞死亡通路相耦联。通过与 I 型干扰素信号、NF-κB 激活以及与炎性小体相关过程的串扰,ZBP1 有助于塑造抗病毒限制能力与组织炎症基调。ZBP1 信号失调与感染中的过度炎症和免疫病理,以及炎症性与神经免疫疾病模型中的相关病理有关,因此是开展先天免疫机制研究的一个有用靶点。
ZBP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Zbp1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Zbp1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Zbp1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Zbp1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。