Von Hippel Lindau/VHL慢病毒激活颗粒(h): sc-400528-LAC

VHL 基因编码 von Hippel–Lindau（VHL）肿瘤抑制蛋白，它是 CRL2^VHL E3 泛素连接酶复合体中负责底物识别的组分，可在氧依赖条件下促使 HIF-1α 和 HIF-2α 发生泛素化并经蛋白酶体降解。通过调控缺氧信号通路，VHL 影响血管生成、红细胞生成、代谢重编程、细胞外基质重塑以及细胞周期控制，将氧感知与转录及蛋白稳态网络联系起来。VHL 的缺失或功能障碍与 HIF 活性失调及细胞对缺氧适应的改变密切相关，这一点与遗传性 VHL 病以及多种肿瘤背景均有关联。

Von Hippel Lindau/VHL 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 VHL 表达。

Von Hippel Lindau/VHL 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在VHL转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Von Hippel Lindau/VHL表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 VHL 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。