Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
VHL Antibody (VHL40): sc-135657. Western blot analysis of VHL expression in HeLa (A), Jurkat (B), RAW 264.7 (C) and F9 (D) whole cell lysates.
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Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(m): sc-423671-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Von Hippel Lindau/VHL 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Von Hippel Lindau/VHL双切酶质粒（m）和Von Hippel Lindau/VHL双切酶质粒（m2）编码针对Vhl的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Von Hippel Lindau/VHL: sc-135657，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(m) | sc-423671-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Von Hippel Lindau/VHL双切口酶质粒(m2) | sc-423671-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Vhl 基因编码 von Hippel–Lindau（VHL）肿瘤抑制蛋白。VHL 是 Cullin-2 型 E3 泛素连接酶复合体的底物识别组分，在常氧条件下，该复合体识别被羟化的 HIF-α，并促使其发生泛素化后由蛋白酶体降解。通过调控 HIF 依赖性的转录，VHL 控制细胞的氧感知、血管生成与代谢相关基因程序、促红细胞生成信号以及氧化还原适应。VHL 功能缺失或减弱会稳定 HIF-1α/HIF-2α，进而重塑糖酵解通量与细胞外基质重塑通路，并改变缺氧反应基因的表达。这些过程被广泛用于在小鼠体系中建立与肿瘤发生及血管生物学相关的缺氧信号、代谢重编程和微环境应答模型。
Von Hippel Lindau/VHL 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Vhl 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Vhl内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Vhl的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Vhl基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。