Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Villin Antibody (12): sc-136119. Western blot analysis of Villin expression in HCT-8 whole cell lysate.
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Villin双切口酶质粒(h): sc-400587-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Villin 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Villin双切酶质粒（h）和Villin双切酶质粒（h2）编码针对VIL1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Villin: sc-58897，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Villin双切口酶质粒(h) | sc-400587-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Villin双切口酶质粒(h2) | sc-400587-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
VIL1 编码 villin，这是一种受 Ca²⁺ 调控的肌动蛋白结合蛋白，富集于肠道及其他上皮细胞。在这些细胞中，villin 通过对 F-肌动蛋白进行成束、加帽和切割，支持微绒毛的组装以及刷状缘结构的建立。借助对顶端细胞骨架的动态重塑，villin 参与维持上皮极性与屏障功能，并与细胞迁移和创伤修复等过程相关。VIL1 表达变化被广泛用作上皮分化的标志物，而与 villin 相关的细胞骨架调控程序失衡也常在上皮损伤、炎症和肿瘤生物学等研究背景中被探讨。作为肌动蛋白动态调控的支架蛋白，villin 将钙信号与磷脂酰肌醇依赖性调控机制连接起来，从而维持顶端细胞表面的结构稳定。
Villin 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 VIL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对VIL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏VIL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了VIL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。