非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Villin (BDID2C3): sc-66022. Caco-2 (A), COLO 205 (B), Hep G2 (C), HCT-8 (D) 和 c4 (E) 全细胞裂解液中 Villin 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Villin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400587
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Villin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Villin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Villin: sc-58897，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Villin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400587 | 20 µg | $397.00 |
概述
VIL1 编码 villin，这是一种上皮细胞特异性的肌动蛋白结合蛋白，富集于肠道和肾脏近端小管细胞的刷状缘。在该处，villin 通过对 F-肌动蛋白（F-actin）的束化、加帽与切割来塑造微绒毛的结构。借助受 Ca2+ 和磷脂酰肌醇类分子调控的肌动蛋白重塑，villin 在上皮细胞分化与再生过程中支持上皮极性、顶端膜表面膜运输以及屏障功能。VIL1 常被用作肠上皮吸收细胞谱系与上皮成熟的标志物；在胃肠道损伤与炎症背景以及上皮肿瘤生物学中，也有关于 villin 表达或定位改变的报道。这些特性使 VIL1 成为研究细胞骨架动态、上皮形态发生与微绒毛维持的一个实用节点。
Villin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中VIL1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对VIL1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏VIL1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Villin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建VIL1缺失的细胞模型，用于Villin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Villin 功能至关重要的 VIL1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 VIL1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Villin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Villin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 VIL1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Villin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Villin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由VIL1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定VIL1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。