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VEGF-D双切口酶质粒(h) | sc-401669-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
VEGF-D双切口酶质粒(h2) | sc-401669-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 **VEGFD** 基因编码 VEGF-D,它是 VEGF 家族的分泌型成员,可通过结合 VEGFR-3(FLT4)和 VEGFR-2(KDR)来调控淋巴管生成与血管生成。蛋白水解加工会增强其与受体的结合能力,并通过下游 PI3K–AKT、MAPK/ERK 和 PLCγ 信号通路促进内皮细胞迁移、生存及血管重塑。VEGF-D 依赖的信号传导参与淋巴管发育、组织液体稳态维持,以及肿瘤微环境中的免疫细胞运输。在多种癌症背景下,VEGF-D 表达或通路活性失调与淋巴系统重塑异常及转移扩散有关,同时也与炎症和水肿等表型相关,这些现象对血管生物学研究具有意义。
VEGF-D 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 VEGFD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对VEGFD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏VEGFD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了VEGFD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。