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USP10双切口酶质粒(m) | sc-423592-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
USP10双切口酶质粒(m2) | sc-423592-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Usp10 编码泛素特异性肽酶 10(USP10),这是一种去泛素化酶,能够逆转由泛素介导的蛋白质周转,从而塑造信号持续时间并维持蛋白质稳态(proteostasis)。USP10 通过调控关键讯号蛋白的稳定性与转运,参与应激反应网络和细胞命运程序的调节,进而影响 DNA 损伤应答、自噬相关周转以及炎症信号传导等过程。通过依赖去泛素化的蛋白丰度控制,USP10 可影响检查点调控、细胞凋亡易感性与代谢适应。USP10 活性失衡与肿瘤学及免疫相关情境中的病理表型有关,使 Usp10 成为在哺乳动物系统中开展泛素通路生物学机制研究的一个有用节点。
USP10 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Usp10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Usp10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Usp10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Usp10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。