Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Twinkle Antibody (1C5): sc-293368. Western blot analysis of Twinkle expression in Jurkat nuclear extract (A) and human skeletal muscle tissue extract (B).
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Twinkle CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-404159
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Twinkle CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Twinkle基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Twinkle: sc-293368，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Twinkle CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-404159 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
TWNK 编码 Twinkle，这是一种线粒体 DNA 解旋酶，对 mtDNA 的复制以及核样体（nucleoids）的维持至关重要，并与线粒体复制体（replisome）协同工作，以支持氧化磷酸化能力。Twinkle 在复制过程中解开双链 mtDNA，有助于维持 mtDNA 拷贝数和基因组完整性，从而影响线粒体转录、呼吸链生物发生以及细胞能量稳态。TWNK 的异常与线粒体基因组不稳定有关，包括 mtDNA 耗竭或多重缺失，并与神经肌肉和神经退行性线粒体疾病表型相关。因此，TWNK 功能缺失研究对于探究线粒体应激信号、生物能量重塑以及复制相关的 mtDNA 损伤应答具有重要意义。
Twinkle CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TWNK基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TWNK基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TWNK开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Twinkle蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TWNK缺失的细胞模型，用于Twinkle信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Twinkle 功能至关重要的 TWNK 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TWNK 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Twinkle CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Twinkle CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TWNK 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Twinkle HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Twinkle HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TWNK同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TWNK靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。