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TTP双切口酶质粒(h) | sc-400722-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TTP双切口酶质粒(h2) | sc-400722-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 ZFP36 基因编码三聚四嘧啶蛋白(tristetraprolin,TTP),这是一种结合 AU 富集元件(AU-rich element, ARE)的 RNA 结合蛋白,可促进不稳定 mRNA 的去腺苷化与降解,从而限制细胞因子及与生长相关转录本的表达。TTP 将转录后调控与炎症信号通路相整合,包括 TNF/NF-κB 通路以及由 MAPK 调控的磷酸化过程;这些调控会影响其 RNA 结合活性与亚细胞定位。通过塑造转录本稳定性调控程序,TTP 影响巨噬细胞活化、应激反应以及细胞周期进程。ZFP36/TTP 的表达或功能异常与炎症失衡及肿瘤相关的基因表达特征有关,因此是研究免疫与致癌网络机制的一个重要靶点。
TTP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ZFP36 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ZFP36内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ZFP36的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ZFP36基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。