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TRAF6双切口酶质粒(m) | sc-423497-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TRAF6双切口酶质粒(m2) | sc-423497-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Traf6 基因编码 E3 泛素连接酶 TRAF6。TRAF6 作为一种适配蛋白,将上游受体与先天和适应性免疫中的下游信号传导连接起来。TRAF6 介导 K63 连接型泛素化事件,推动 Toll 样受体、IL‑1 受体家族成员、CD40 和 RANK 下游的 NF‑κB 与 MAPK 级联通路激活,从而影响细胞因子产生、破骨细胞分化以及炎症基因表达程序。通过这些通路,TRAF6 参与宿主防御、组织重塑与免疫稳态;其功能失衡常在慢性炎症、骨代谢紊乱以及免疫介导性疾病等背景下被研究。
TRAF6 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Traf6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Traf6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Traf6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Traf6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。