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TPX2慢病毒激活颗粒(h) | sc-402581-LAC | 200 µl | $455.00 |
TPX2(靶向 Xklp2 的蛋白)编码一种与微管相关的纺锤体组装因子,在有丝分裂期间富集于中心体和纺锤体微管,促进 Aurora A 激酶的激活,并稳定动粒纤维。TPX2 通过协调微管成核、纺锤体极组织以及染色体分离,帮助调控细胞周期在 G2/M 转换期的推进,并支持有丝分裂检查点控制的准确性。TPX2 表达失调常与增殖表型和基因组不稳定性相关,因此在非整倍体、有丝分裂应激反应以及肿瘤生物学研究中被广泛用作标志物和关键机制节点。TPX2 依赖的信号传导与调控微管动力学、中心体功能以及由 Aurora 激酶调控的磷酸化网络等通路相互交叉。
TPX2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TPX2 表达。
TPX2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TPX2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TPX2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TPX2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。