Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Topo IIβ双切口酶质粒(h): sc-400773-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Topo IIβ 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Topo IIβ双切酶质粒（h）和Topo IIβ双切酶质粒（h2）编码针对TOP2B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Topo IIβ: sc-365071，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Topo IIβ双切口酶质粒(h) | sc-400773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Topo IIβ双切口酶质粒(h2) | sc-400773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TOP2B 编码人类 DNA 拓扑异构酶 IIβ（Topo IIβ）。Topo IIβ 是一种 ATP 依赖性酶，通过产生短暂的 DNA 双链断裂并随后重新连接 DNA，来解除 DNA 的超螺旋和链环（catenane）结构。Topo IIβ 对转录调控、染色质拓扑结构，以及 DNA 复制与染色体分离的正常进行都很重要，因此与 DNA 损伤应答和基因组稳定性通路密切相关。其活性与多种过程交叉，包括姐妹染色单体解缠（decatenation）、转录过程中扭转应力的释放，以及高阶染色质结构的维持。TOP2B 功能失调或拓扑异构酶 II 介导的异常 DNA 断裂与基因组不稳定性和基因表达程序改变有关，这些现象已在癌症生物学和神经发育模型研究中得到关注。
Topo IIβ 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TOP2B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TOP2B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TOP2B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TOP2B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。