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Tom20双切口酶质粒(h) | sc-400041-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Tom20双切口酶质粒(h2) | sc-400041-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TOMM20 编码 Tom20,它是线粒体外膜易位酶(TOM)复合体的核心受体,能够识别蛋白质 N 端的线粒体靶向序列,并启动由细胞核编码的蛋白导入线粒体。Tom20 通过与其他 TOM 组分以及下游 TIM 易位酶协同作用,支持线粒体生物发生、呼吸链装配和蛋白质稳态,从而影响氧化磷酸化、氧化还原稳态以及凋亡信号传导。线粒体蛋白导入过程受扰可引发生物能量应激、线粒体动力学改变以及先天免疫激活,这些变化与神经退行性变、心代谢功能障碍和肿瘤相关的代谢重塑有关。因此,TOMM20 是研究线粒体质量控制通路和应激响应信号网络的一个有价值的关键节点。
Tom20 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TOMM20 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TOMM20内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TOMM20的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TOMM20基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。