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TNIK双切口酶质粒(h) | sc-401523-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
TNIK双切口酶质粒(h2) | sc-401523-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TNIK(TRAF2 and NCK interacting kinase)编码一种生发中心激酶(germinal center kinase)家族的丝氨酸/苏氨酸激酶,可整合调控细胞骨架组织、细胞极性以及转录程序的信号。TNIK通过与TCF/LEF转录复合物相互作用,作为Wnt/β-连环蛋白信号通路的调节因子,并参与影响黏附、迁移和神经元发育的相关通路。在多种疾病背景中,TNIK活性或表达失调与异常的Wnt通路输出以及增殖或侵袭表型的改变相关,因此成为研究信号网络调控机制的一个有价值的关键节点。在人类细胞中,TNIK也因其在突触功能以及由激酶驱动的信号串扰(cross-talk)中塑造细胞状态转换的作用而受到关注。
TNIK 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TNIK 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TNIK内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TNIK的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TNIK基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。