Teneurin-1CRISPR激活质粒(h): sc-408663-ACT

人类 **TENM1** 基因编码 teneurin-1，这是一种大型 II 型跨膜糖蛋白，在神经系统中高度富集，能够在轴突导向、突触组织以及神经回路形成过程中介导细胞–细胞黏附与接触依赖性的信号传导。Teneurin-1 参与细胞外基质相互作用和跨突触识别程序，从而塑造神经突起的生长与连接；并与调控细胞骨架重塑和转录状态的发育信号网络整合。TENM1 的遗传改变和表达异常与神经发育相关表型及肿瘤生物学有关，支持其在研究神经元分化、迁移以及异常细胞通讯中的重要性。这些特性使 TENM1 成为解析神经发育通路以及与疾病相关的细胞黏附与信号变化的有用靶点。

Teneurin-1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TENM1的表达。

Teneurin-1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的TENM1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于TENM1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Teneurin-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的TENM1位点，并能够研究内源性位点上依赖于Teneurin-1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TENM1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Teneurin-1通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。