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synphilin-1双切口酶质粒(h) | sc-406126-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
synphilin-1双切口酶质粒(h2) | sc-406126-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SNCAIP 编码 synphilin-1,这是一种细胞质蛋白,可与 α-突触核蛋白以及泛素–蛋白酶体系统和自噬机制的多种组分相互作用,因此与细胞蛋白稳态(proteostasis)密切相关。Synphilin-1 参与蛋白聚集的动态过程,并可调控包涵体形成、囊泡运输以及应激响应的质量控制通路。通过与 E3 泛素连接酶和蛋白酶体相关因子的相互作用,SNCAIP 影响错误折叠蛋白的周转,并可能进而影响神经元稳态。Synphilin-1 功能或定位的改变已在突触核蛋白病(synucleinopathies)的研究中被广泛关注,该领域的核心实验主题之一是蛋白处理失衡与聚集体病理。
synphilin-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SNCAIP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SNCAIP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SNCAIP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SNCAIP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。