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SUZ12CRISPR激活质粒(h) | sc-401551-ACT | 20 µg | $397.00 |
SUZ12 编码多梳抑制复合体 2(PRC2)的核心组分之一,并与 EZH2 和 EED 协同,通过 H3K27 甲基化建立并维持抑制性染色质状态。通过调控染色质可及性,SUZ12 促成稳定的转录沉默程序,从而调节谱系决定、细胞周期控制以及发育相关基因网络。涉及 SUZ12 的 PRC2 活性异常已被关联到多种癌症情境和神经发育表型中的表观遗传调控紊乱,使其成为研究染色质重塑与转录稳态的重要节点。SUZ12 依赖的抑制作用通过对基因表达的广泛影响,与控制分化、增殖以及 DNA 损伤应答的通路发生交叉。
SUZ12 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SUZ12的表达。
SUZ12 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SUZ12基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SUZ12转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SUZ12表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SUZ12位点,并能够研究内源性位点上依赖于SUZ12的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SUZ12表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SUZ12通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。