![Su[fu] Antibody (F-4) - Western Blotting - Image 55082The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.](https://media.scbio.cn/product/sufu-double-nickase-plasmids-m-western-blotting_05_50_b_55082.jpg)
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Su[fu] Antibody (F-4): sc-137014. Western blot analysis of Su[fu] expression in IMR-32 (A), SK-N-SH (B), EOC 20 (C) and C6 (D) whole cell lysates.
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Su[fu]双切口酶质粒(m): sc-423973-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Su[fu] 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Su[fu]双切酶质粒（m）和Su[fu]双切酶质粒（m2）编码针对Sufu的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Su[fu]: sc-137014，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Su[fu]双切口酶质粒(m) | sc-423973-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Su[fu]双切口酶质粒(m2) | sc-423973-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Sufu（Suppressor of Fused）编码一种关键的细胞内 Hedgehog 信号通路抑制因子，可抑制 GLI 转录因子，并在胚胎模式形成与组织稳态维持过程中帮助设定通路激活的阈值。在小鼠细胞中，Su[fu]在 PTCH1/SMO 下游调控 GLI 的加工处理、核定位以及转录输出，将其与依赖初级纤毛的信号传导和发育相关基因程序联系起来。SUFU 功能受损与异常的 Hedgehog 通路活性相关，这种异常通路活性与先天畸形及肿瘤发生过程有关，因此 Sufu 常被用作研究信号转导调控的关键节点。以 Sufu 为中心的模型也支持研究该通路与细胞周期调控、分化以及干/祖细胞维持之间的串扰。
Su[fu] 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Sufu 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sufu内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Sufu的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Sufu基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。