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SR-2A双切口酶质粒(h) | sc-401532-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SR-2A双切口酶质粒(h2) | sc-401532-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HTR2A 编码 5-羟色胺受体 2A(SR-2A),这是一类 G 蛋白偶联受体,主要与 Gq/11 偶联以激活磷脂酶 C,增强细胞内 Ca²⁺ 信号,并启动依赖 PKC 的磷酸化级联反应。SR-2A 信号可与 MAPK/ERK 通路发生交互,并调控影响神经元兴奋性、突触可塑性及皮层环路活动的基因表达程序。在人体组织中,HTR2A 的表达及其受体信号常在神经递质传递与神经调质网络调控的背景下被研究。研究文献将 SR-2A 通路活性改变以及 HTR2A 的调控性变异与神经精神表型及治疗反应差异联系起来,支持其在阐明 5-羟色胺能信号机制研究中的相关性。
SR-2A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HTR2A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HTR2A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HTR2A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HTR2A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。