Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SQSTM1 Antibody (D-3) Alexa Fluor® 647: sc-28359 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of SQSTM1 expression in HeLa (A), MDA-MB-231 (B) and SK-BR-3 (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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SQSTM1/p62双切口酶质粒(h): sc-400099-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SQSTM1/p62 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SQSTM1/p62双切酶质粒（h）和SQSTM1/p62双切酶质粒（h2）编码针对SQSTM1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SQSTM1/p62: sc-28359，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SQSTM1/p62双切口酶质粒(h) | sc-400099-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SQSTM1/p62双切口酶质粒(h2) | sc-400099-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SQSTM1（p62）是一种多功能衔接蛋白，能够通过其泛素结合结构域和 LC3 相互作用区域，将多聚泛素化的货物连接到自噬体上，从而协调选择性自噬与蛋白质稳态（proteostasis）。它也作为信号枢纽参与多条通路，包括 KEAP1–NRF2 氧化应激反应、NF-κB 激活以及 mTORC1 营养感应，将应激与炎症信号与代谢调控整合在一起。通过这些作用，SQSTM1 影响蛋白聚集体清除、线粒体质量控制以及细胞生存/死亡的决策。SQSTM1/p62 生物学失衡常见于神经退行性疾病、肿瘤细胞的应激适应以及炎症性疾病等研究领域，在这些情况下自噬与氧化还原信号往往受到扰动。
SQSTM1/p62 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SQSTM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SQSTM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SQSTM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SQSTM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。