非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
smoothelin 抗体 (2Q1120): sc-73042. 非转染: sc-117752 (A) 和人 smoothelin 转染: sc-113663 (B) 293T 全细胞裂解液中 smoothelin 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
smoothelin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-400923
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- smoothelin CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在smoothelin基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：smoothelin: sc-376902，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
smoothelin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-400923 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
SMTN 编码 smoothelin（平滑肌蛋白），这是一种细胞骨架蛋白，选择性地富集于完全分化的平滑肌细胞中，并与肌动蛋白丝的组织及收缩装置的完整性相关联。Smoothelin 参与调控平滑肌的收缩性、细胞结构，以及在血管和内脏平滑肌重塑过程中表型稳定性的维持。SMTN 表达模式的改变常被用作平滑肌分化状态的标志，并与血管重塑、纤维化相关的肌成纤维细胞转分化以及血管张力变化等过程有关。作为一种谱系受限的细胞骨架成分，SMTN 适用于研究调控平滑肌成熟、机械转导以及细胞骨架信号网络的机制。
smoothelin CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SMTN基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SMTN基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SMTN开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使smoothelin蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SMTN缺失的细胞模型，用于smoothelin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 smoothelin 功能至关重要的 SMTN 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SMTN 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 smoothelin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 smoothelin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SMTN 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 smoothelin HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 smoothelin HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SMTN同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SMTN靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。