Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Smad4 Antibody (B-8): sc-7966. Western blot analysis of Smad4 expression in NTERA-2 cl.D1 (A), HL-60 (B), ACHN (C), F9 (D), BYDP (E) and U266 (F) whole cell lysates.
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Smad4双切口酶质粒(m): sc-421527-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Smad4 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Smad4双切酶质粒（m）和Smad4双切酶质粒（m2）编码针对Smad4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Smad4: sc-7966，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Smad4双切口酶质粒(m) | sc-421527-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Smad4双切口酶质粒(m2) | sc-421527-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Smad4 编码一种核心的共 SMAD 转录介导因子，可整合受体激活的 SMAD2/3 与 SMAD1/5/8 信号，在 TGF-β 与 BMP 通路下游调控具有情境依赖性的基因表达。SMAD4 通过与其他 SMAD 及 DNA 结合辅因子协同作用，控制细胞周期调控、分化、细胞外基质重塑和免疫调节等相关程序。Smad4 信号的扰动会重塑上皮–间质可塑性与组织稳态，因此常被作为研究发育模式形成以及与纤维化相关转录反应的重点。在肿瘤生物学中，SMAD4 功能改变常被用作机制切入点，以在小鼠模型中探究 TGF-β 通路如何在抑制生长与促侵袭的转录输出之间发生“切换”。
Smad4 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Smad4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Smad4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Smad4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Smad4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。