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SHIP-1双切口酶质粒(h) | sc-400619-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SHIP-1双切口酶质粒(h2) | sc-400619-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
INPP5D 编码 SHIP-1(Src 同源结构域含肌醇 5-磷酸酶 1),这是一种在造血系统中高表达的脂质磷酸酶,可将 PI(3,4,5)P3 转化为 PI(3,4)P2,从而限制 PI3K–AKT 信号的强度与持续时间。通过与磷酸化的免疫受体及适配蛋白相互作用,SHIP-1 调控 Fc 受体和 BCR 信号传导、细胞因子应答、趋化以及髓系和淋巴系细胞的存活程序。该调控节点影响先天与适应性免疫稳态,并与调节炎症信号和细胞命运决定的通路发生交叉。INPP5D/SHIP-1 活性失衡已在血液病研究中与免疫功能障碍及肿瘤相关信号背景联系起来,因此成为研究 PI3K 通路调控机制的一个有价值靶点。
SHIP-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 INPP5D 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对INPP5D内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏INPP5D的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了INPP5D基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。