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SDHB双切口酶质粒(h) | sc-401529-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
SDHB 编码琥珀酸脱氢酶(线粒体复合体 II)的铁硫亚基,该复合体将三羧酸循环中琥珀酸的氧化与呼吸链中电子向泛醌的传递相偶联。凭借这一双重作用,SDHB 有助于调控线粒体能量代谢、氧化还原稳态,以及补充反应(anaplerosis)和生物合成通路中的代谢通量。SDHB 功能受损可导致琥珀酸积累,并引发下游信号改变,从而影响缺氧诱导因子(HIF)通路,以及通过依赖 α-酮戊二酸(α-ketoglutarate)的双加氧酶介导的表观遗传调控。SDHB 的遗传与功能异常与线粒体功能障碍相关,并在代谢重编程和肿瘤易感综合征研究中受到广泛关注。
SDHB 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SDHB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SDHB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SDHB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SDHB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。