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SDF-1/CXCL12双切口酶质粒(h) | sc-400268-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SDF-1/CXCL12双切口酶质粒(h2) | sc-400268-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CXCL12(SDF-1/CXCL12)是一种维持稳态的趋化因子,主要通过CXCR4和CXCR7/ACKR3介导信号传导,为细胞迁移与组织构建提供方向性指引。其浓度梯度可调控白细胞转运、造血干/祖细胞在骨髓微环境(龛位)中的滞留,以及发育与修复过程中血管细胞与基质细胞之间的相互作用。下游信号通常涉及PI3K–AKT、MAPK/ERK、JAK/STAT和Rho GTPase等通路,以协同调控趋化运动、生存与黏附。CXCL12轴活性失衡与炎症性疾病机制及肿瘤微环境生物学密切相关,包括免疫细胞浸润模式和转移龛位形成,因此常被作为机制研究的重点靶点。
SDF-1/CXCL12 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CXCL12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CXCL12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CXCL12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CXCL12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。