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RICK双切口酶质粒(h) | sc-400731-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RICK双切口酶质粒(h2) | sc-400731-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RIPK2 编码受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 2(RICK),这是一种位于胞质中的激酶,作为 NOD1 和 NOD2 模式识别受体下游的关键衔接蛋白发挥作用。在感知到细菌肽聚糖片段后,RICK 促进依赖多聚泛素化的信号复合体组装,从而激活 NF-κB 和 MAPK 通路,驱动炎症基因表达与先天免疫反应。RICK 还与泛素信号网络发生交互,并可在特定情境下影响细胞应激反应及程序性细胞死亡信号。RIPK2 信号调控失衡与炎症性及免疫介导性疾病的发生机制相关,其中包括与肠道炎症及其他慢性炎症状态相关的通路。
RICK 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RIPK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RIPK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RIPK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RIPK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。