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RAGE双切口酶质粒(h) | sc-400284-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RAGE双切口酶质粒(h2) | sc-400284-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
AGER 编码晚期糖基化终末产物受体(RAGE)。RAGE 属于免疫球蛋白超家族的多配体模式识别受体,可与 AGEs、S100 蛋白、HMGB1 及其他损伤相关分子结合。RAGE 信号可通过 NF-κB、MAPK/ERK、JNK/p38、PI3K/AKT 以及依赖 Rho GTPase 的细胞骨架重塑等通路,放大炎症反应与氧化应激反应。受体持续被激活可促进细胞因子产生、黏附分子表达以及屏障功能改变,从而将 RAGE 生物学与慢性炎症和组织重塑联系起来。AGER/RAGE 活性失调与糖尿病相关血管并发症、动脉粥样硬化、神经炎症以及肿瘤相关炎症有关,因此在先天免疫信号机制研究中常被作为重要靶点。
RAGE 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 AGER 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对AGER内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏AGER的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了AGER基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。