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Rad21慢病毒激活颗粒(h) | sc-402348-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
人类 RAD21 基因编码 Rad21 蛋白,它是黏连蛋白复合体(cohesin)的核心 kleisin 亚基,负责将姐妹染色单体连接在一起,并组织更高阶的染色质结构。Rad21 对准确的染色体分离、DNA 双链断裂修复至关重要,并通过增强子–启动子通讯以及拓扑相关结构域(TAD)边界来调控基因表达。通过 cohesin 与 CTCF 及复制/修复因子的协同作用,RAD21 影响细胞周期进程和基因组稳定性相关通路。RAD21 剂量或 cohesin 功能的扰动与黏连蛋白病(cohesinopathies)有关;在癌症生物学研究中,这类改变也与转录程序异常以及染色体不稳定性相关。
Rad21 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RAD21 表达。
Rad21 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在RAD21转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Rad21表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 RAD21 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。