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Rab 14双切口酶质粒(m) | sc-427035-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rab 14双切口酶质粒(m2) | sc-427035-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Rab14 基因编码小GTP酶 Rab14,它属于 RAS 超家族成员,通过在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间循环切换来协调细胞内膜运输。Rab14 调控内吞回收以及在高尔基体、内体与质膜之间的生物合成性运输;其通过与效应蛋白及 SNARE 机器相互作用,影响货物分选、受体周转和囊泡成熟。这些过程与信号转导、营养摄取及细胞骨架组织相互交织,使 Rab14 成为研究膜动力学扰动的一个有用节点。文献报道 Rab14 依赖的运输失调与细胞迁移和代谢稳态改变相关,并且常在增殖性疾病和神经生物学疾病模型中被研究,因为囊泡运输可对表型产生贡献。
Rab 14 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Rab14 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Rab14内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Rab14的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Rab14基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。