Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PTN Antibody (H-6): sc-74443. Fluorescent western blot analysis of PTN expression in non-transfected: sc-117752 (A) and mouse PTN transfected: sc-122837 (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-CFL 555: sc-533654.
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PTN CRISPR/Cas9 KO质粒 (m2): sc-422498-KO-2
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PTN CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m2） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PTN基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PTN: sc-74443，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PTN CRISPR/Cas9 KO质粒 (m2) | sc-422498-KO-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Ptn 编码多效营养因子 pleiotrophin（PTN），这是一种分泌型、可结合肝素的生长因子，在发育及组织重塑过程中调控细胞—细胞与细胞—基质之间的通讯。PTN 通过与受体型蛋白酪氨酸磷酸酶及其他细胞表面伙伴相互作用来传递信号，从而影响磷酸化级联反应、神经突起生长、细胞迁移以及细胞存活等程序，其中包括与 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 相关的过程。在小鼠模型中，PTN 与神经发育模式形成、血管生成反应以及炎症微环境的调控有关；在损伤与增殖信号等不同背景下也有其表达改变的报道。这些功能使 Ptn 成为解析细胞外生长因子输入如何塑造谱系行为、突触连通性以及基质—免疫串扰的一个有用节点。
PTN CRISPR/Cas9 KO质粒（m2）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Ptn基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Ptn基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Ptn开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PTN蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Ptn缺失的细胞模型，用于PTN信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PTN 功能至关重要的 Ptn 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Ptn 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PTN CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PTN CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Ptn 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PTN HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PTN HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Ptn同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Ptn靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。