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PPARγ双切口酶质粒(m) | sc-422363-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PPARγ双切口酶质粒(m2) | sc-422363-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Pparg 编码过氧化物酶体增殖物激活受体 γ(PPARγ),这是一种由配体激活的核受体型转录因子,调控控制脂肪细胞分化、脂质储存、葡萄糖稳态以及抗炎信号传导的基因程序。PPARγ 与 RXR 形成异源二聚体并结合 PPAR 反应元件,在脂肪组织、巨噬细胞及其他代谢相关细胞类型中协同组织转录网络。其活性与胰岛素信号、脂肪酸代谢以及细胞因子驱动的通路相互交织,从而影响能量平衡与免疫表型。PPARγ 信号失调常通过小鼠模型在肥胖、胰岛素抵抗、脂肪肝生物学、动脉粥样硬化及炎症性疾病等研究背景中被重点探讨。
PPARγ 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pparg 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pparg内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pparg的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pparg基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。