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PPARγ双切口酶质粒(h) | sc-400030-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PPARγ双切口酶质粒(h2) | sc-400030-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PPARG 编码过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),这是一种配体激活的核受体,可与 RXR 形成异源二聚体,从而调控控制脂肪生成、脂质摄取与储存以及胰岛素敏感性的转录程序。PPARγ 通过调节脂肪酸代谢、葡萄糖稳态和巨噬细胞极化等通路整合代谢与炎症信号,进而影响细胞因子信号传导与组织重塑。PPARG 活性或表达的改变与肥胖、胰岛素抵抗和血脂异常等代谢功能障碍相关,也常在肝脂肪变性和炎症性疾病等背景中被研究。由于其作为转录调控枢纽的作用,PPARG 常被用于在人类细胞模型中解析基因调控网络与代谢状态转换。
PPARγ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PPARG 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PPARG内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PPARG的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PPARG基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。