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Pin1双切口酶质粒(h) | sc-400485-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Pin1双切口酶质粒(h2) | sc-400485-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 PIN1 基因编码 Pin1,这是一种磷酸化依赖性的肽基-脯氨酰顺/反异构酶,能够识别 Ser/Thr‑Pro 基序,并催化构象转换,从而调控蛋白质的稳定性、亚细胞定位以及信号输出。Pin1 整合来自脯氨酸定向激酶的输入,并通过环素 D1、c‑Myc、p53 和 tau 等底物,调节细胞周期推进、转录调控、DNA 损伤应答与应激信号等关键通路。通过重塑磷酸化蛋白的构象,Pin1 影响泛素介导的降解与检查点控制,将磷酸化动态与蛋白质稳态联系起来。PIN1 活性失调与致癌信号程序及神经退行性过程相关,因此它常被用作研究磷酸化驱动调控机制的重要节点。
Pin1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PIN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PIN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PIN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PIN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。