非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
Phox2b CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401351
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Phox2b CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Phox2b基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Phox2b: sc-376997，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Phox2b CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401351 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
PHOX2B 编码 Phox2b，这是一种配对样同源盒（paired-like homeobox）转录因子，通过在神经嵴与后脑分化/分区（patterning）过程中调控基因表达程序，统筹自主神经系统的发育以及去甲肾上腺素能神经元的分化。Phox2b 调控与儿茶酚胺生物合成、神经元命运决定与成熟相关的转录网络，并与影响神经祖细胞命运选择及外周神经系统谱系承诺的通路相互作用。PHOX2B 功能异常与神经嵴病（neurocristopathies）密切相关，包括先天性中枢性低通气综合征；同时也与来源于神经嵴的发育性肿瘤（如神经母细胞瘤）相关，这反映了其在建立并维持自主神经元身份中的关键作用。作为一种定义细胞谱系的调控因子，PHOX2B 是研究神经发育转录调控以及细胞状态稳定性与重编程机制的有用关键节点。
Phox2b CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PHOX2B基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PHOX2B基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PHOX2B开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Phox2b蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建PHOX2B缺失的细胞模型，用于Phox2b信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Phox2b 功能至关重要的 PHOX2B 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 PHOX2B 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Phox2b CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Phox2b CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PHOX2B 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Phox2b HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Phox2b HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PHOX2B同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PHOX2B靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。