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PGDH双切口酶质粒(h) | sc-402622-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PGDH双切口酶质粒(h2) | sc-402622-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 HPGD 基因编码 15-羟基前列腺素脱氢酶(PGDH),这是一种关键的 NAD⁺ 依赖性氧化还原酶,催化前列腺素及其他二十碳烷酸类(eicosanoids)失活过程中的第一步且为限速步骤。PGDH 通过将 PGE2 等具有生物活性的前列腺素转化为活性较低的 15-酮代谢物,帮助抑制炎症信号、调节血管张力,并在花生四烯酸代谢中维持上皮稳态。HPGD 活性发生改变会重塑由前列腺素驱动的通路,从而影响细胞因子网络、基质—上皮串扰以及组织重塑。该轴的失调常在慢性炎症和肿瘤生物学等研究背景中被重点关注,因为前列腺素周转会影响细胞增殖、迁移以及微环境信号传导。
PGDH 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HPGD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HPGD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HPGD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HPGD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。