Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PCCB Antibody (E-7): sc-515741. Western blot analysis of PCCB expression in Hep G2 (A) and HeLa (B) whole cell lysates and human liver (C), human kidney (D), human brain (E) and mouse brain (F) tissue extracts.
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PCCB CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-426258
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PCCB CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PCCB基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PCCB: sc-515740，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PCCB CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-426258 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
小鼠 Pccb 编码丙酰辅酶A羧化酶（propionyl‑CoA carboxylase，PCC）的β亚基（PCCB）。PCC 是一种依赖生物素的线粒体酶，催化丙酰‑CoA 转化为甲基丙二酰‑CoA。该反应将支链氨基酸（缬氨酸、异亮氨酸）、奇数链脂肪酸以及胆固醇侧链的分解代谢，与通过琥珀酰‑CoA 向三羧酸（TCA）循环提供补充底物（anaplerosis）的过程连接起来。PCCB 的功能通过防止丙酰‑CoA 来源代谢物的积累，支持线粒体代谢与细胞能量稳态。丙酰‑CoA 羧化酶活性受损与丙酸血症（propionic acidemia）的生物学机制相关，因此 Pccb 是在小鼠模型中研究代谢应激反应及线粒体通路适应的一个有用基因位点。
PCCB CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Pccb基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Pccb基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Pccb开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PCCB蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Pccb缺失的细胞模型，用于PCCB信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PCCB 功能至关重要的 Pccb 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Pccb 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PCCB CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PCCB CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Pccb 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PCCB HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PCCB HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Pccb同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Pccb靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。