Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PAR-2 Antibody (SAM11) Alexa Fluor® 488: sc-13504 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of PAR-2 expression in NIH/3T3 (A) and 3611-RF (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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PAR-2双切口酶质粒(m): sc-420265-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PAR-2 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PAR-2双切酶质粒（m）和PAR-2双切酶质粒（m2）编码针对F2rl1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PAR-2: sc-13504，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PAR-2双切口酶质粒(m) | sc-420265-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PAR-2双切口酶质粒(m2) | sc-420265-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 F2rl1 基因编码蛋白酶激活受体-2（PAR-2），这是一种 G 蛋白偶联受体，可通过丝氨酸蛋白酶介导的蛋白水解作用“揭露”其系链配体而被激活。PAR-2 信号可动员 Gq/11 和 G12/13 通路，调控细胞内 Ca2+ 通量、PKC 激活、MAPK/ERK 级联反应、与 NF-κB 相关的炎症转录以及细胞骨架重塑。通过这些过程，PAR-2 调节上皮屏障功能、血管与平滑肌反应、伤害感受信号传导以及先天免疫细胞的激活。PAR-2 活性失调与炎症和纤维化程序相关，并在气道与肠道炎症、皮炎、痛觉过敏以及肿瘤—基质通讯等模型中被广泛研究。
PAR-2 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 F2rl1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F2rl1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏F2rl1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了F2rl1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。