Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PAR-2 Antibody (SAM11): sc-13504. Western blot analysis of PAR-2 expression in WiDr whole cell lysate.
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PAR-2双切口酶质粒(h): sc-400333-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PAR-2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PAR-2双切酶质粒（h）和PAR-2双切酶质粒（h2）编码针对F2RL1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PAR-2: sc-13504，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PAR-2双切口酶质粒(h) | sc-400333-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PAR-2双切口酶质粒(h2) | sc-400333-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
F2RL1 编码蛋白酶激活受体-2（PAR-2），这是一种 G 蛋白偶联受体，可被丝氨酸蛋白酶介导的切割所激活；该切割会暴露出一个系链配体（tethered ligand）。PAR-2 信号可动员 Gq/11 与 β-arrestin 通路，引发细胞内 Ca²⁺ 通量、MAPK/ERK 激活、NF-κB 依赖的转录以及细胞骨架重塑，从而塑造炎症信号与上皮屏障反应。它还被认为与凝血以及激肽释放酶相关蛋白酶网络存在串扰，将细胞外蛋白水解与细胞因子产生和白细胞募集联系起来。PAR-2 活性失调与炎症和纤维化过程、疼痛与瘙痒信号传导，以及与癌症生物学相关的肿瘤-微环境相互作用有关。
PAR-2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 F2RL1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F2RL1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏F2RL1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了F2RL1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。