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PAK4双切口酶质粒(h) | sc-401895-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PAK4双切口酶质粒(h2) | sc-401895-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PAK4 编码 p21 激活激酶 4(p21-activated kinase 4),是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,位于 Cdc42 等 Rho 家族 GTP 酶的下游,协调细胞骨架重塑、细胞极性以及定向迁移。PAK4 信号与调控黏着斑周转、肌动蛋白动态以及促存活信号的通路相互衔接,从而影响包括黏附依赖性生长和侵袭行为在内的多种过程。通过对细胞骨架及调控类底物进行磷酸化,PAK4 参与调控细胞凋亡抵抗与细胞周期进程。PAK4 表达或活性失调与致癌信号背景及转移表型相关,因此常被作为研究肿瘤细胞运动性和存活机制的重点靶标。
PAK4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PAK4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PAK4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PAK4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PAK4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。