Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
p300 Antibody (NM11) Alexa Fluor® 488: sc-32244 AF488. Direct fluorescent western blot analysis of p300 expression in MCF7 nuclear extract. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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p300双切口酶质粒(m): sc-435902-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- p300 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- p300双切酶质粒（m）和p300双切酶质粒（m2）编码针对Ep300的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：p300: sc-48343，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
p300双切口酶质粒(m) | sc-435902-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
p300双切口酶质粒(m2) | sc-435902-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Ep300 编码 p300，这是一种作用广泛的赖氨酸乙酰转移酶和转录共激活因子，可乙酰化组蛋白及非组蛋白底物，从而塑造染色质可及性并调控基因表达程序。p300 整合来自多种转录因子的信号，并参与增强子功能、细胞周期控制、DNA 损伤应答以及谱系特异性分化。通过调节依赖乙酰化的转录网络，p300 影响多条通路，例如 p53 介导的应激反应、TGF-β/SMAD 信号传导以及炎症基因调控。EP300 活性失调与多种疾病相关情境中观察到的表观遗传状态改变和转录重塑有关，包括肿瘤生物学、发育障碍和免疫功能紊乱等。
p300 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Ep300 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Ep300内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Ep300的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Ep300基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。