Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Op18 Antibody (A-4): sc-48362. Western blot analysis of Op18 expression in K-562 whole cell lysate.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Op18双切口酶质粒(h): sc-401656-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Op18 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Op18双切酶质粒（h）和Op18双切酶质粒（h2）编码针对STMN1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Op18: sc-55531，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Op18双切口酶质粒(h) | sc-401656-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Op18双切口酶质粒(h2) | sc-401656-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
STMN1 编码 stathmin/癌蛋白 18（Op18），是一种存在于细胞质中的磷酸化蛋白，能够与微管蛋白异二聚体结合并促进微管“灾变”（快速解聚），从而精细调控纺锤体组装、有丝分裂进程以及细胞内运输。其活性受 MAPK、PI3K/AKT 等信号节点下游的磷酸化调控，将生长因子输入与细胞骨架动力学和细胞周期控制相耦联。STMN1 表达失调在肿瘤生物学中常与增殖和侵袭表型相关，也在神经退行性疾病模型中与神经元微管稳定性改变有关。因此，STMN1 被广泛用于研究调控有丝分裂、迁移和应激反应等重塑微管网络的通路。
Op18 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 STMN1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对STMN1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏STMN1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了STMN1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。