
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NOS1双切口酶质粒(h) | sc-418493-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
NOS1双切口酶质粒(h2) | sc-418493-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 NOS1 基因编码神经元型一氧化氮合酶(nNOS),这是一种受钙/钙调蛋白调控的酶,可将 L-精氨酸转化生成一氧化氮(NO),从而调节 cGMP 信号传导。由 NOS1 产生的 NO 参与调控神经递质传递、突触可塑性、神经血管耦联以及平滑肌张力;此外,还可通过形成反应性氮物种在氧化还原稳态中发挥作用。在细胞内,NOS1 活性与 NMDA 受体依赖的钙内流、MAPK 信号以及将 nNOS 定位到特定亚细胞微区的支架蛋白复合体相互整合。NOS1 信号失调与多种神经及精神表型、疼痛处理以及心血管调控相关,因此是研究 NO 依赖性通路机制的有用靶点。
NOS1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NOS1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NOS1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NOS1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NOS1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。