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Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9慢病毒激活颗粒(h) | sc-402753-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9慢病毒激活颗粒(h2) | sc-402753-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
CHRNA9 编码烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的 α9 亚基。该受体为配体门控离子通道组分,可与其他伴侣亚基组装,介导乙酰胆碱诱发的阳离子通量以及下游依赖 Ca2+ 的信号传导。由 CHRNA9 介导的受体活性会影响膜兴奋性、突触及非神经元胆碱能信号,并通过与离子稳态和第二信使级联反应相耦联的通路调节细胞反应。在人类组织中,CHRNA9 表达或受体功能的改变与感觉与炎症相关生物学过程有关,并在癌症相关信号表型及其他涉及胆碱能通路失调的疾病背景下受到研究。因此,CHRNA9 是用于解析烟碱型受体亚基组成、刺激依赖的转录程序以及由胆碱能线索驱动的细胞状态转变的有用靶点。
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CHRNA9 表达。
Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CHRNA9转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CHRNA9 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。