Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
N-SMase Antibody (56-7): sc-100593. Western blot analysis of N-SMase expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human N-SMase transfected: sc-159286 (B) 293T whole cell lysates.
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N-SMase双切口酶质粒(h): sc-405568-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- N-SMase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- N-SMase双切酶质粒（h）和N-SMase双切酶质粒（h2）编码针对SMPD2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：N-SMase: sc-100593，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
N-SMase双切口酶质粒(h) | sc-405568-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
N-SMase双切口酶质粒(h2) | sc-405568-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 SMPD2 基因编码中性鞘磷脂酶（neutral sphingomyelinase，N-SMase），这是一种膜相关酶，可水解鞘磷脂生成神经酰胺和磷胆碱，从而塑造鞘脂组成及其信号输出。N-SMase 的活性通过依赖神经酰胺的机制参与应激反应调控、膜微区动态变化、内膜系统运输，并与细胞凋亡和炎症信号程序发生串扰。通过控制神经酰胺通量，SMPD2 影响与内质网（ER）应激和脂质稳态相关的通路，包括对 MAPK/NF-κB 信号以及囊泡运输的下游影响。涉及 SMPD2 的鞘脂代谢失衡已在神经退行性变、代谢功能障碍以及癌症相关的应激适应等背景中被研究，支持其作为疾病生物学研究靶点的相关性。
N-SMase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SMPD2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SMPD2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SMPD2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SMPD2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。