Date published: 2026-7-21

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Myotilin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406960

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Myotilin CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在Myotilin基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:Myotilin: sc-393957,通过WB, IF或者IHC分析
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    Myotilin CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-406960
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    MYOT 基因编码肌联蛋白(myotilin),这是一种定位于 Z 盘的细胞骨架蛋白,可与肌动蛋白相关组分结合,从而支持横纹肌中肌节的组织结构与机械稳定性。肌联蛋白通过与 α-辅肌动蛋白(α-actinin)和丝连蛋白 C(filamin C)等蛋白相互作用,参与肌原纤维发生并维持 Z 盘结构,进而影响细胞骨架信号传导与机械力传导(mechanotransduction)。MYOT 功能受损与肌原纤维肌病及相关肌肉疾病有关,这类疾病常表现为 Z 盘解体和蛋白质聚集,因此 MYOT 也是研究肌肉完整性与应激反应的重要对象。作为收缩组织中的结构枢纽,肌联蛋白常被用于探究调控肌肉分化、蛋白质质量控制以及细胞骨架重塑的相关通路。

    Myotilin CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中MYOT基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对MYOT基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏MYOT开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使Myotilin蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建MYOT缺失的细胞模型,用于Myotilin信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 Myotilin 功能至关重要的 MYOT 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 MYOT 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 Myotilin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Myotilin CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 MYOT 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 Myotilin HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 Myotilin HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由MYOT同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定MYOT靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。