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Mts1双切口酶质粒(h) | sc-401774-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Mts1双切口酶质粒(h2) | sc-401774-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
S100A4 编码钙结合蛋白 Mts1,是 S100 蛋白家族成员之一,可作为细胞质内及细胞外的调控因子,参与调节细胞运动性与细胞骨架动力学。Mts1 可与非肌肉肌球蛋白 II 等靶蛋白相互作用,并调控肌动蛋白重塑、黏着斑周转以及类似上皮–间质转化(EMT)的程序等过程。通过钙依赖性信号传导,并与调控迁移与侵袭的通路发生串扰,S100A4 常被用于研究肿瘤进展、纤维化及炎症微环境。S100A4 表达失衡还与基质活化和免疫细胞运输的改变相关,因此是解析转移相关信号网络的一个有用节点。
Mts1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 S100A4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对S100A4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏S100A4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了S100A4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。