Date published: 2026-7-21

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mTOR双切口酶质粒(m): sc-425273-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • mTOR 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • mTOR双切酶质粒(m)和mTOR双切酶质粒(m2)编码针对Mtor的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:mTOR: sc-517464,通过WB, IF或者IHC分析
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    mTOR双切口酶质粒(m)

    sc-425273-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    mTOR双切口酶质粒(m2)

    sc-425273-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Mtor 编码丝氨酸/苏氨酸激酶 mTOR。mTOR 是营养可用性、能量状态、氧张力以及生长因子信号的关键整合枢纽,负责协调细胞生长与代谢。mTOR 通过组装形成 mTORC1 和 mTORC2,借助 S6K、4E-BP1 和 AKT 等下游效应因子,调控蛋白质合成、自噬、脂质与核苷酸生物合成、线粒体功能以及细胞骨架组织。mTOR 通路活性会影响细胞增殖、分化和免疫细胞激活,因此 Mtor 也与发育程序和组织稳态相关研究紧密相连。mTOR 信号失调被广泛认为与肿瘤生物学、代谢性疾病表型以及神经发育和神经退行性机制有关,使其成为在小鼠模型中解析通路机制的核心节点。

    mTOR 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mtor 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mtor内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mtor的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mtor基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。